國家海洋局《污水生物毒性監測技術規程發光細菌急性毒性測試-費歇爾弧菌法》提到,樣品毒性水平的表征方法采用檢測結果中的15min發光抑制率H進行評價。根據H大小將毒性等級分為3級,相應等級分別為低度毒性風險、中度毒性風險、高度毒性風險,分級方法如表1所示。中科院土壤研究所制訂的水質毒性分級標準中,根據相對發光率的大小將毒性等級分為低毒、中毒、重毒、高毒、劇毒5個等級。
發光細菌檢測水質生物毒性結果的評價標準:
目前,市面上應用最廣泛的發光細菌有3種:明亮發光桿菌、費氏弧菌、青海弧菌,如圖1所示。其中,明亮發光桿菌和費氏弧菌為海洋菌,青海弧菌為我國發現的淡水菌。ZnSO-4·7H2O對3種菌種的EC50(單一化學物質使抑光率達到50%時該物質的濃度)小的為費氏弧菌,費氏弧菌的靈敏度更高。
明亮發光桿菌(P.phosphoreum)以及費氏弧菌(Vibriofischeri)等所涉的國內外標準。ISO11348的3個標準,主要區別在于費氏弧菌的狀態不同:第1標準采用的是新鮮制備的費氏弧菌;第2標準采用的是液體干細菌;第3標準采用是凍干粉細菌。其中,ISO11348-3-2017是應用最廣泛的發光細菌生物毒性檢測國際標準。涉及青海弧菌的暫時沒有標準,僅在《水和廢水監測分析方法》第四版書籍中提到。
發光細菌的區別:
ISO11348-3-2017與GB15441—1995相比,主要有以下兩點區別:
1)利用的發光細菌不同,且保存菌種的溫度不同,前者用的是費氏弧菌,保存溫度為-20℃;后者為明亮發光細菌,保存溫度為2~5℃;因此,對于需要長期保存的凍干粉而言,冷凍溫度越低越好;
2)前者要求測定加入水樣前發光細菌的原始熒光強度,并根據對照試樣做出校正,避免了細菌樣品不均勻帶來的誤差影響。
慕迪WTox-8000生物毒性在線分析儀采用ISO 11348 的方法,以發光細菌(費希爾弧菌)和樣品反應時的發光強度變化來快速準確地測試出樣品的毒性,毒譜范圍含蓋多于五千種潛在的毒性物質。廣泛用于飲用水水源安全、應急評估及多種污染物毒性測定,毒性測試技術是一種基于生物傳感技術的毒性檢測系統,它提供一種有效應對供水污染(無論是故意破壞還是事故造成的)的檢測手段。由于急性毒性測試可以在5~30分鐘內完成,因而能保證對水質變化進行快速反應。
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